近日，动科所家禽遗传育种团队在鸡原始生殖细胞（Primordial Germ Cells, PGCs）转染技术研究方面取得新突破，研究成果以《Achieving Optimal Electro-Transfection Conditions in Chicken Primordial Germ Cells Under Feeder- and Serum-Free Medium》）为题，发表于期刊《Animals》（中科院农林科学二区，IF=3.5）。动科所为论文第一完成单位，赵智锋博士后和邹娴研究员为共同第一作者，罗成龙研究员为通讯作者。

　　作为家禽种质资源保存与基因编辑的核心载体，PGCs利用存在着转染效率低、转染后细胞损伤大等问题，限制了在家禽基因编辑模型中的高效应用。针对这一技术瓶颈，研究团队系统优化了无饲养层无血清培养体系中PGCs的电穿孔转染条件，结果表明利用电穿孔转染质粒的效率普遍高于40%，其中最高可达71.13±1.26%，且转染后PGCs凋亡率低，细胞活性好，多能性不受影响。该转染体系还适用于miRNA的高效递送，为PGCs的体外功能研究提供了有力手段。

　　研究进一步利用CRISPR/Cas9技术将荧光标记基因GFP定点插入Z染色体上，获得了稳定表达GFP基因的PGCs株系，定点插入效率由最初不到1%提高到15%（7天），为同类研究最高水平。因此，应用该转染体系两周即可获得足量阳性PGCs用于鸡胚显微注射从而制备基因修饰鸡。该技术突破对其他干细胞和难转染细胞具有重要借鉴意义，也为构建基因编辑家禽模型、性别控制及种质创新提供了高效平台。

　　本研究获国家肉鸡产业技术体系（CARS-41）、广东省农业科学院协同创新中心项目（XT202217）、猪禽种业学科建设子项目（ZX202401-03）、广东省重点研发计划（2022B0202110002）及猪禽种业全国重点实验室专项（GDNKY-ZQQZ-K8、GDNKY-ZQQZ-K11）项目资助。

　　原文链接：https://www.mdpi.com/2076-2615/15/4/590